Revisões, Atualizações e Artigos Originais • • https://doi.org/10.1590/S0004-27302004000100006 copiar Egberto G. de Moura Carmen C. Pazos de Moura Sobre os autores
A secreção de tireotrofina (TSH) é determinada pelo efeito estimulatório do hormônio hipotalâmico estimulador de tireotrofina (TRH) e pela retroalimentação negativa exercida pelos hormônios tireóideos (HT). Superpostos, atuam outros reguladores e aferências do sistema nervoso central. Somatostatina e dopamina inibem a secreção de TSH, já as vias alfa-adrenérgicas centrais são predominantemente estimuladoras e participariam no estímulo da secreção de TSH pelo frio. O estado nutricional modula o eixo através da leptina, por vias diretas e indiretas. O estresse induz redução da secreção de TSH, e discute-se a participação dos glicocorticóides, citocinas e opiáceos. Recentemente, evidenciou-se que fatores locais produzidos na adenohipófise podem atuar de forma autócrina/parácrina, modulando a secreção de TSH. Dentre estes, destacam-se a neuromedina B e o peptídeo liberador de gastrina, que atuam como inibidores locais da secreção de TSH. Discute-se ainda, as alterações do TSH decorrentes da programação neonatal, por hormônios ou desnutrição. Tireotrofina; Hormônios tireóideos; Leptina; Secreção; Biosíntese; Peptídeos reguladores
The set point of thyrotropin (TSH) secretion is determined by the balance of a positive regulation of thyrotropin releasing hormone (TRH) and the strong negative regulation exerted by thyroid hormones. In addition, there are other regulators superimposed on this main axis such as somatostatin and dopamine, which act as inhibitors of TSH secretion, and central alpha-adrenergic pathways that are predominantly stimulatory and involved in the cold-induced thyroid activation. Nutritional status and leptin also regulate TSH by stimulating TRH neurons through direct and indirect mechanisms. Stress is also involved in lowering TRH/TSH secretion possibly through glucocorticoids, cytokines and opioids. Recently, a new regulatory pathway has been proposed, via peptides produced in pituitary, acting in an autocrine/paracrine manner. Among those, more consistent data are available on neuromedin B, gastrin-releasing peptide and pituitary leptin, which act as local inhibitors of TSH release. Neonatal programming of TSH secretion set point is also discussed. Thyrotropin; Thyroid hormones; Leptin; Secretion; Biosynthesis; Regulatory peptides
REVISÃO Regulação da síntese e secreção de tireotrofina Regulation of thyrotropin synthesis and secretion Egberto G. de Moura; Carmen C. Pazos de Moura Departamento de Ciências Fisiológicas, Instituto de Biologia, Universidade do Estado do Rio de Janeiro (EGM); e Laboratório de Endocrinologia Molecular, Instituto de Biofísica Carlos Chagas Filho, Universidade Federal do Rio de Janeiro (CCPM), Rio de Janeiro, RJ Endereço para correspondência RESUMO A secreção de tireotrofina (TSH) é determinada pelo efeito estimulatório do hormônio hipotalâmico estimulador de tireotrofina (TRH) e pela retroalimentação negativa exercida pelos hormônios tireóideos (HT). Superpostos, atuam outros reguladores e aferências do sistema nervoso central. Somatostatina e dopamina inibem a secreção de TSH, já as vias alfa-adrenérgicas centrais são predominantemente estimuladoras e participariam no estímulo da secreção de TSH pelo frio. O estado nutricional modula o eixo através da leptina, por vias diretas e indiretas. O estresse induz redução da secreção de TSH, e discute-se a participação dos glicocorticóides, citocinas e opiáceos. Recentemente, evidenciou-se que fatores locais produzidos na adenohipófise podem atuar de forma autócrina/parácrina, modulando a secreção de TSH. Dentre estes, destacam-se a neuromedina B e o peptídeo liberador de gastrina, que atuam como inibidores locais da secreção de TSH. Discute-se ainda, as alterações do TSH decorrentes da programação neonatal, por hormônios ou desnutrição. Descritores: Tireotrofina; Hormônios tireóideos; Leptina; Secreção; Biosíntese; Peptídeos reguladores ABSTRACT The set point of thyrotropin (TSH) secretion is determined by the balance of a positive regulation of thyrotropin releasing hormone (TRH) and the strong negative regulation exerted by thyroid hormones. In addition, there are other regulators superimposed on this main axis such as somatostatin and dopamine, which act as inhibitors of TSH secretion, and central alpha-adrenergic pathways that are predominantly stimulatory and involved in the cold-induced thyroid activation. Nutritional status and leptin also regulate TSH by stimulating TRH neurons through direct and indirect mechanisms. Stress is also involved in lowering TRH/TSH secretion possibly through glucocorticoids, cytokines and opioids. Recently, a new regulatory pathway has been proposed, via peptides produced in pituitary, acting in an autocrine/paracrine manner. Among those, more consistent data are available on neuromedin B, gastrin-releasing peptide and pituitary leptin, which act as local inhibitors of TSH release. Neonatal programming of TSH secretion set point is also discussed. Keywords: Thyrotropin; Thyroid hormones; Leptin; Secretion; Biosynthesis; Regulatory peptides A TIREOTROFINA (TSH, THYROID STIMULATING HORMONE) é o principal regulador hormonal da produção e secreção de hormônios tireóideos (HTs). Por outro lado, os HTs são os principais reguladores da secreção de TSH, num sistema clássico de retroalimentação (feedback) negativa.
Além dos HTs que inibem a síntese e secreção de TSH, o mais importante regulador vem a ser um hormônio hipotalâmico, o hormônio liberador de TSH, (TRH, thyrotropin releasing hormone), que estimula a síntese e secreção de TSH, sendo também inibido pelos HTs. Outros hormônios, peptídeos e neurotransmissores produzidos no hipotálamo ou outras regiões do sistema nervoso central desempenham um papel modulador na regulação do TSH, como a somatostatina, a adrenalina e noradrenalina, a dopamina, a substância P. Outros peptídeos, produzidos na própria hipófise têm um papel parácrino ou autócrino sobre a secreção de TSH, tais como a neuromedina B e o peptídeo liberador de gastrina (GRP). Substâncias que são liberadas em situações de infecção e estresse, tais como as interleucinas, o cortisol, substância P, também influenciam a secreção de TSH. Moduladores da regulação da fome e saciedade, tais como a leptina, a galanina, a orexina, o hormônio liberador de corticotrofina (CRH), o hormônio estimulador dos melanócitos (MSH), também modulam a secreção desse hormônio. Todas estas substâncias têm uma razão em modular a secreção de TSH, já que este é o principal regulador dos HTs e estes desempenham importante papel em basicamente todas as funções do organismo, tais como o crescimento e desenvolvimento somático e neural, a termogênese, o metabolismo intermediário e a função sexual. Com tal abrangência de funções não é surpreendente que o principal determinante de sua produção, o TSH, possua uma multiplicidade de mecanismos regulatórios que permitam que a secreção dos HTs seja ajustada adequadamente em diferentes situações nas quais é exigida a sua atuação. Além disso, recentemente se tem demonstrado que a regulação hormonal pode ser programada em períodos críticos da vida de um organismo, especialmente na gestação, lactação e infância, predispondo o organismo a melhor se adaptar durante a vida, a situações nutricionais, emocionais ou físicas, encontradas no período neonatal. TSH Características Bioquímicas O TSH é produzido na adenohipófise em células denominadas tireotrofos, que correspondem, num indivíduo normal, a aproximadamente 5% do total de células adeno-hipofisárias. É um hormônio glicoprotéico com peso molecular de 28.000, constituído por duas sub-unidades, a e ß, unidas por ligações não covalentes. As sub-unidades a e ß são codificadas por genes distintos localizados nos cromossomas humanos 6 e 1, respectivamente. A sub-unidade a é produzida em maior quantidade que o TSH, sendo, portanto, a sub-unidade ß que limita esta produção. Enquanto a sub-unidade a é comum ao hormônio folículo estimulante (FSH), hormônio luteinizante (LH) e à gonadotrofina coriônica (hCG), a sub-unidade ß do TSH é específica, sendo responsável pela especificidade imunológica e biológica deste hormônio (1). Apesar disto, os HTs inibem a síntese de ambas as sub-unidades e, desta forma, também podem regular a síntese de LH, FSH e hCG. O TSH é glicosilado, e isto lhe confere uma proteção em relação à degradação intracelular, além de permitir que o mesmo se dobre adequadamente para permitir a formação de pontes dissulfeto, desta forma a glicosilação é importante para o efeito biológico do TSH (2). Em pacientes com hipotireoidismo primário, o TSH circulante tem maior conteúdo de ácido siálico, proporcionalmente à gravidade do hipotireoidismo. Estas moléculas de TSH têm maior meia-vida plasmática, com diminuição da depuração renal. Entretanto, sua atividade biológica intrínseca está reduzida, pois o maior teor de ácido siálico diminui a capacidade do TSH de ativar a cascata de sinalização pós-ligação ao receptor (2). Normalmente, o TSH hipofisário e circulante é heterogêneo na sua composição de carboidratos, o que faz com que estas isoformas de TSH circulante tenham diferentes atividades biológicas intrínsecas. Em seres humanos, a concentração sérica de TSH varia entre 0,5 a 5mU/L. A sua meia-vida é de 30 a 50 minutos e a sua taxa de produção é de 40 a 150mU/dia ou 100 a 400mU/dia. Esta taxa de secreção pode aumentar em até 15 vezes em indivíduos hipotireóideos (1,2). A secreção de TSH é pulsátil e circadiana. A secreção pulsátil é caracterizada por flutuações no intervalo de 1 a 2 horas. Porém, devido à baixa amplitude destas secreções e ao fato de que a sua meia-vida é relativamente longa, as concentrações séricas de TSH variam muito pouco. Além disso, há uma secreção tônica de TSH, contribuindo para a sua concentração sérica. A magnitude desta flutuação está diminuída em caso de jejum, doenças ou cirurgias (2). A variação circadiana é caracterizada por um pico noturno que precede o início do sono e parece ser dependente do ritmo do cortisol e das flutuações dos HTs. Se o início do sono for retardado, o pico de TSH torna-se maior e mais prolongado. Efeito oposto ocorre quando se dorme mais cedo (3). Regulação por HTs Feedback Negativo A diminuição da concentração sérica de T3 ou T4 leva a aumento na síntese e secreção de TSH, pois tanto o T3 sérico quanto o formado na hipófise ou hipotálamo pela conversão de T4 a T3 inibem a síntese e secreção de TSH ou TRH (2). Existe uma relação linear entre as concentrações séricas de T4 e o logarítimo das concentrações séricas de TSH (4). Portanto, as concentrações séricas de TSH podem ser utilizadas como um bom índice do estado tireoideano nos seres humanos. Os HTs regulam diferentes etapas da síntese e secreção de TSH. A inibição da síntese de TSH pelos HTs resulta da diminuição dos níveis de RNA mensageiro para as sub-unidades a e ß do hormônio por diminuição da transcrição de seus genes (5). Esses efeitos são observados em tempo coincidente com a ligação de T3 aos seus receptores nucleares e são mediados, diretamente, por T3, não sendo bloqueados por inibidores da síntese protéica. Na deficiência da produção de HTs ocorre grande aumento nos níveis de RNA mensageiro para as sub-unidades a e ß de TSH, com conseqüente aumento da síntese deste hormônio (5). A regulação do processo de liberação do TSH pelos HTs ainda é pouco conhecida. Evidências experimentais in vivo e in vitro sugerem que a atuação mais rápida seja sobre o mecanismo celular de liberação do TSH, envolvendo a participação de intermediários protéicos, uma vez que inibidores de síntese protéica bloqueiam o efeito inibitório dos HTs sobre a liberação do TSH armazenado na adeno-hipófise (6). Os HTs atuam, também, na resposta secretória do TSH ao TRH, estando esta aumentada no hipotireoidismo e diminuída no hipertireoidismo (7). Em cultura de células, o T3 foi capaz de diminuir o número de receptores para TRH, após 48 horas, em cerca de 20% (8). Outra forma dos HTs regularem a ação do TRH é através do estímulo à síntese da ectoenzima que causa degradação do TRH. Os hormônios tireóideos aumentam os níveis de RNAm para esta enzima presente nas membranas de células adeno-hipofisárias (9). Portanto, os HTs modulam o número de receptores para TRH nos tireotrofos e a degradação local do TRH, regulando, assim, a resposta hipofisária a este hormônio. Além da atuação hipofisária, os HTs atuam no hipotálamo inibindo a síntese de TRH no núcleo paraventricular (7). Outro ponto de regulação hipotalâmica pelos HTs é o controle da somatostatina, que, como veremos a seguir, é um inibidor fisiológico da secreção de TSH. O conteúdo hipotalâmico de somatostatina encontra-se diminuído em ratos hipotireóideos e é restaurado pelo tratamento com T3 (10). A Importância da Desiodação Hipofisária A inibição da secreção de TSH pelos HTs é dada, principalmente, pela conversão hipofisária (e talvez hipotalâmica) de T4 a T3. Na adeno-hipófise, 50% do T3 ligado a receptores nucleares provém da conversão local de T4 a T3, revelando a importância da atuação das desiodases hipofisárias (11). Estudos pioneiros de Silva e Larsen (12) já sugeriam que a desiodase do tipo 2 (D2) seria a principal responsável pela inibição da secreção de TSH pelos HTs. Estudos recentes demonstraram que, na ausência da D2 em animais geneticamente manipulados de forma que a expressão de D2 foi anulada (knockout), o TSH sérico está elevado (13). Já em animais com deficiência genética de desiodase tipo 1, o TSH não está alterado (14). A D2 hipofisária é regulada pelos HTs; assim, no hipertireoidismo, diminui a expressão do RNAm para D2 e no hipotireoidismo encontra-se aumentada (15). As Isoformas de Receptores para HTs no Eixo Hipotálamo-Hipófise e Sua Regulação A ação dos HTs é fundamentalmente dependente dos seus receptores (TR), que são proteínas nucleares ligadoras de T3, reguladoras da transcrição gênica. Na adeno-hipófise estão presentes as isoformas de TR: TR a1 e ß1, que são as expressas mais amplamente nos tecidos e, especialmente, há abundância na expressão da isoforma ß2, cuja distribuição é mais restrita ao sistema nervoso central. Na hipófise, os HTs inibem as isoformas ß2 e a1, enquanto estimulam a isoforma ß1 (5). A importância relativa das diferentes isoformas de TR no controle da secreção de TSH por hormônios tireoideanos tem sido elucidada a partir de estudos utilizando modelos de animais transgênicos. Camundongos knockout para o gene do TR ß (16), mas não para o gene do TRa (17), apresentam aumento de TSH e de HTs. Camundongos knockout apenas para o TR ß2 apresentam fenótipo muito semelhante ao knockout para o gene do TRß (ß1 e ß2), sugerindo fortemente que a isoforma ß2 seja aquela que é a mais importante em intermediar o efeito de retroalimentação negativa dos HTs sobre o TSH (18). Entretanto, sabe-se que também a isoforma a participa neste efeito, uma vez que, na ausência do TRß normal, a inibição da atuação hipofisária do TRa, por expressão de um TRß mutado dominante negativo, levou a grande elevação do TSH sérico e dos HTs, com total resistência à ação dos HTs (19,20). No feedback dos HTs no hipotálamo, também a isoforma ß2 é aquela que participa de forma mais importante, como revelado pelos estudos com animais TR ß2 knockout (21). Além disso, evidenciou-se que, para que ocorra o fenótipo característico da Síndrome Humana de Resistência aos Hormônios Tireoideanos, TSH normal ou aumentado com HTs elevados, é necessário que, além de resistência hipofisária, haja também resistência hipotalâmica nos neurônios de TRH (22). Tal achado ilustra a importância do feedback negativo dos HTs no hipotálamo. TRH O TRH é um tripeptídeo, piroglutamil histidil prolinamida, processado a partir de um grande precursor, o prepro-TRH, cuja estrutura é bastante conservada em mamíferos. O processamento e a clivagem do prepro-TRH dão origem a vários peptídeos, entre eles o TRH. O TRH e seu RNAm encontram-se amplamente distribuídos pelo organismo, no hipotálamo, medula espinhal, pâncreas, retina, entre outros órgãos, onde, na maioria das vezes, sua função é pouco conhecida (7). O TRH responsável pelo estímulo à síntese e secreção do TSH é produzido por neurônios parvocelulares situados nos núcleos paraventriculares do hipotálamo médio basal. Estes neurônios se projetam até a eminência média, onde o TRH é liberado em capilares do sistema porta-hipofisário, através do qual chega à adeno-hipófise (2). A meia-vida plasmática do TRH é muito curta, variando, aproximadamente, de 2 a 6 minutos em estados de hiper ou hipotireoidismo, respectivamente, uma vez que é rapidamente degradado nos tecidos-alvo e no sangue pela enzima piroglutamil aminopeptidase, que é altamente específica para o TRH. A atividade desta enzima na hipófise anterior é estimulada pelos HTs (9). Na adeno-hipófise, o TRH atua através de receptores específicos na membrana plasmática. Estes fazem parte da grande família dos receptores ligados à proteína G e seu principal mediador intracelular é o cálcio iônico, que ativa a proteina cinase C (7). O papel fisiológico do TRH pode ser demonstrado experimentalmente ao se provocar lesões na região tireotrófica do hipotálamo de ratos. Estas lesões resultam em TSH sérico diminuído, com conseqüente decréscimo da produção de HTs (23). Recentemente, demonstrou-se que camundongos com deleção do gene para TRH apresentam baixas concentrações de HTs (24). O mesmo ocorre em individuos com hipotireoidismo central. O teste do TRH é um importante exame para se avaliar a integridade do eixo hipotálamo-hipófise-tireóide e consiste na administração de 200 a 500µg de TRH por via endovenosa e medida do TSH 15 minutos antes da administração, no momento da administração e 15,30, 60 e 120 minutos após a injeção do TRH. O pico de TSH, que pode chegar a até 22 vezes a concentração sérica basal, ocorre aos 30 minutos em indivíduos eutireóideos. O T3 e o T4 sérico se elevam, após 3 a 8 horas, respectivamente (1). Os HTs são mais importantes que o estímulo hipotalâmico pelo TRH, na regulação da secreção de TSH e, portanto, nos indivíduos hipertireóideos, o teste do TRH encontra-se suprimido. Nos pacientes com hipotireoidismo primário, devido à insuficiência tireóidea, o teste apresenta picos elevados, enquanto que no hipotireoidismo secundário, devido à falência hipofisária, não há resposta ao teste. Se a infusão do TRH for continuada, ocorrem dois picos de secreção de TSH. Um de liberação rápida, conseqüente ao TSH estocado na glândula e outro devido à síntese de TSH (1). Caso a infusão continue, o TSH aumenta a produção de T4, que, por sua vez inibe a secreção de TSH, mesmo que o TRH continue a ser infundido (25). A síntese das sub-unidades do TSH é estimulada pelo TRH, observando-se aumento dos níveis de RNA mensageiro para as sub-unidades a e ß do TSH de forma bem rápida, após 30 minutos da administração do TRH (1). O TRH tem importante papel na modulação da atividade biológica do TSH, uma vez que é capaz de modificar o processamento pós-tradução, alterando a composição dos carboidratos da molécula de TSH. Em alguns pacientes com hipotireoidismo central, assim como nos animais que não expressam TRH, o TSH sérico pode ser normal ou ligeiramente aumentado, porém a função tireoideana está deprimida, devido à baixa atividade biológica do TSH (2). O tratamento crônico com TRH leva a aumento da bioatividade do TSH circulante, presumivelmente por alteração na composição glicídica. Somatostatina A somatostatina, um tetradecapeptídeo hipotalâmico associado inicialmente à inibição do hormônio do crescimento (GH), inibe, também, a liberação de TSH tanto in vivo quanto in vitro (1), através do aumento dos níveis intracelulares da proteína G inibitória (Gi). O bloqueio da somatostatina endógena obtida pela administração de soro anti-somatostatina em ratos resultou em aumento da concentração sérica de TSH, o que demonstra ser a somatostatina um inibidor tônico da secreção de TSH (7). Porém, o tratamento crônico com seus análogos é incapaz de produzir hipotireoidismo, como no caso de tumores hipofisários produtores de TSH ou GH (26). Ela inibe a amplitude de pulso do TSH e seus picos de secreção noturna (27), diretamente na hipófise e através da inibição do TRH e do número de seus receptores hipofisários (28). Dopamina Tanto a dopamina, quanto o seu agonista, a bromocriptina, inibem a secreção de TSH, através da inibição da adenilatociclase (7). Este bloqueio se dá pela inibição da expressão do gene para a sub-unidade ß do TSH, da amplitude dos picos de secreção e dos picos noturnos (1). O bloqueio dos receptores de dopamina, pela metoclopramida, estimulam a secreção de TSH (7). Entretanto, a administração crônica dos agonistas dopaminérgicos para o tratamento de prolactinomas não está associada a hipotireoidismo (29).
Regulação Autócrina e Parácrina Recentemente, vários peptídeos e proteínas, tais como leptina, neurotensina, substância P, neuropeptídeo Y, galanina, opióides endógenos, fatores de crescimento, citocinas, peptídeos bombesina-símiles e outros, têm sido encontrados na hipófise. Estas substâncias são sintetizadas localmente, assim como seus receptores. Estes achados, aliados a estudos com a glândula isolada ou em cultura de células adeno-hipofisárias, têm sugerido a existência de uma regulação local de TSH, onde estes fatores atuariam de forma autócrina e/ou parácrina, modulando a resposta a fatores extra-hipofisários. Entretanto, o papel funcional destes peptídeos encontrados na adeno-hipófise, na maioria das vezes, ainda é desconhecido. Apenas poucos peptídeos preenchem todos os critérios necessários para serem considerados reguladores autócrinos ou parácrinos da secreção de TSH. A evidência mais direta para ação autócrina/parácrina é obtida através de estudos in vitro com as hipófises isoladas ou cultura de células usando duas metodologias com o objetivo de reduzir ou abolir os efeitos endógenos destes peptídeos: 1) o bloqueio do receptor, por um antagonista farmacológico, ou 2) a imunoneutralização do peptídeo, usando-se um anticorpo específico. Comprova-se a importância fisiológica quando o efeito do antagonista ou do anti-soro é contrário ao efeito do peptídeo (30). A utilização de modelos de animais transgênicos, cujos genes são deletados (knockouts) ou hiper-expressos, podem ajudar muito na compreensão do papel fisiológico destes peptídeos, especialmente se puderem ser direcionados para os genes na hipófise. Apesar de preencherem os critérios, alguns destes peptídeos, por serem produzidos em grande quantidade em tecidos extra-hipofisários, podem exercer ação hormonal sobre a hipófise, a qual pode ser muito mais importante que seu papel autócrino ou parácrino. Alguns peptídeos da família das bombesinas, a Neuromedina B (NB) e o peptídeo liberador de gastrina (GRP, gastrin releasing peptide), parecem também exercer um controle autócrino ou parácrino sobre a secreção de TSH. A NB é encontrada em grande concentração na hipófise, onde é sintetizada e expressa seus receptores (31,32) e, em ratos, só foi detectada nos tireotrófos (33). O hipotireoidismo está associado a baixas concentrações de NB, enquanto o hipertireoidismo aumenta sua concentração hipofisária, assim como a expressão do seu RNAm (32,33). Análogos da somatostatina, como o octeotride, que inibem o TSH, aumentam a concentração de NB (34). A NB encontra-se elevada em situações experimentais associadas com a redução da liberação de TSH, tais como jejum e diabetes mellitus (35), enquanto o TRH e o frio inibem sua expressão hipofisária (36). Todas estas modificações que relacionam inversamente as concentrações de NB e TSH estão relacionadas temporalmente e confirmam uma estreita relação entre estas duas substâncias. A NB parece exercer seu efeito diretamente na hipófise, como demonstram os estudos com explantes hipofisários, tanto em condições basais quanto por estímulo com TRH (37,38). Além disso, a imunoneutralização da NB endógena aumenta a secreção de TSH por hipófises isoladas, comprovando o seu efeito fisiológico (39). Este efeito é bem maior nas hipófises de animais hipertireóideos do que nas dos eutireóideos, e está ausente nas hipófises de animais hipotireóideos, mostrando que o aumento da NB, que ocorre no hipertireoidismo, pode ter um papel na inibição do TSH, nesta situação (39). Confirmando esta observação, um dos autores demonstrou que uma única injeção de T3 em animais hipotireóideos é capaz de aumentar a secreção de NB e está relacionada no tempo à diminuição da concentração sérica de TSH (40,41). Tanto o incremento de NB quanto a queda de TSH dependem de síntese protéica e são bloqueados pela actinomicina D, que inibe a transcrição do DNA (36). Em 1981, Melmed e cols. propuseram um fator intermediário da ação dos HTs sobre a inibição da secreção rápida de TSH a partir do reservatório já sintetizado. Este fator poderia ser transferido entre tecidos hipofisários mantidos em cultura e a NB pode ser um bom candidato a ser este fator. Os estudos in vivo também reforçam o papel da NB como intermediária da ação dos HTs na regulação do TSH. A NB diminui a concentração sérica de TSH, quer injetada no terceiro ventrículo cerebral quer endovenosamente (37). Este efeito inibitório foi demonstrado, mesmo em animais altamente hipotireóideos (39). E assim, como in vitro, a administração do anti-soro contra NB no terceiro ventrículo cerebral aumenta a secreção de TSH, demonstrando o papel fisiológico da NB (37). Em animais hipertireóideos, uma concentração maior de anticorpo é necessária para que este efeito seja observado, graças ao fato de que, provavelmente, a NB encontra-se em altas concentrações neste estado patológico (39). O GRP, seu receptor, assim como a expressão do seu RNAm, também foi encontrado na adeno-hipófise, porém em menor concentração que a NB, e não foi encontrado nos tireotrófos, mas nas células produtoras de prolactina e de hormônio adrenocorticotrófico (31,42). O GRP apresenta atividade inibitória sobre o TSH tanto in vivo (43) quanto in vitro (44). Apesar dos receptores para GRP serem mais abundantes na hipófise do que os de NB (31), a dose empregada para inibir o TSH é maior para o GRP (44). A importância fisiológica do GRP, na inibição do TSH, foi demonstrada pelo efeito estimulatório da secreção de TSH por dois antagonistas do GRP (44). Não se pode, no entanto, descartar que este efeito se dê pelo bloqueio dos receptores de NB. Não foram feitos estudos com imunoneutralização do GRP. Apesar da maioria dos estudos terem sido realizados em ratos, pelo menos um estudo demonstra a atuação da bombesina no bloqueio da secreção de TSH estimulada por TRH em seres humanos (45). A substância P (SP) foi evidenciada nos tireotrófos de seres humanos (46), através de imunohistoquímica, e o RNAm para seu precursor também foi encontrado na hipófise (47), assim como seu receptor (48). A tireoidectomia aumenta enquanto o hipertireoidismo diminui o conteúdo hipofisário de SP (49), o contrário do que ocorre com a NB. A SP age diretamente na hipófise estimulando a secreção de TSH por hipófises isoladas (50). Porém, quando injetada in vivo, diminui a concentração sérica de TSH e bloqueia a ação estimulatória do TRH ou do frio (51). Portanto, a SP apresenta um efeito inibitório no hipotálamo e estimulatório na hipófise. Há uma interação entre estes peptídeos, visto que o GRP é capaz de bloquear o efeito estimulatório da SP em hipófises isoladas (50). A neurotensina foi localizada nos tireotrófos, através de imunocitoquímica (52), e seu RNAm na hipófise é positivamente regulado pelos HTs (53). Apresenta um efeito inibitório direto na secreção basal e, estimulada por TRH, in vitro (54) e in vivo, quando administrada no terceiro ventrículo cerebral de ratos (55). A administração crônica de neurotensina diminui a concentração sérica de T4, mas não a de T3 (56). O fator de crescimento epidermal (EGF, epidermal growth factor) foi detectado em tireotrófos de ratos, onde também foram encontrados receptores para EGF (57). EGF estimula a liberação de TSH em hipófises de ratos perfundidas e, quando injetado in vivo (58), o EGF pode ser um mediador da resposta do TSH ao frio, já que este estimula a expressão hipofisária de EGF e seu receptor (57). O fator de crescimento de fibroblastos (FGF) também foi encontrado na hipófise (59), mas não foi comprovada a sua síntese hipofisária. O FGF também estimula a secreção basal de TSH e, estimulada por TRH, em cultura de células hipofisárias de ratos (60). Porém, ratos injetados com FGF apresentam uma pequena diminuição no seu TSH sérico, em 24 horas, mas o tratamento crônico leva a aumento da tireóide, da secreção de HTs e de TSH. O aumento da secreção de HTs não ocorre quando animais hipofisectomizados são tratados com FGF cronicamente, o que sugere que este efeito é através do aumento do TSH (61). Reguladores da Ingestão Alimentar e do Peso Corporal e TSH A regulação da ingestão alimentar e do peso corporal é bastante complexa, envolvendo a interação de vários hormônios, neurotransmissores e peptídeos diversos sobre diferentes tecidos. Entretanto, os HTs desempenham um papel importante na regulação do metabolismo e, por sua vez, é regulado por diversos fatores que participam deste complexo mecanismo de regulação na manutenção do peso corporal. A leptina, inicialmente descoberta como um fator produzido pelo tecido adiposo que induz saciedade, é hoje considerada como um hormônio que informa o estado nutricional do organismo e, com isto, estabelece uma adaptação integrada do consumo alimentar e do metabolismo energético. A leptina, seu RNAm e seu receptor foram encontrados na hipófise humana, de camundongos e de ratos (62,63). Está bem caracterizado que a deficiência de leptina no jejum está associada a diminuição da função tireoideana que ocorre nesta situação, sendo que a administração de leptina restaura a concentração sérica de hormônios tireóideos, mesmo com a manutenção do jejum (64). Este efeito parece ocorrer através do estímulo da secreção de TRH, pois a leptina estimula a biossíntese de TRH por mecanismos diretos e indiretos através da modulação de neurônios aferentes aos de TRH e, através desta via, estimula a liberação de TSH em ratos em jejum (65). Recentemente, um dos autores demonstrou que a leptina age diretamente na hipófise isolada, inibindo a liberação de TSH e a imunoneutralização da leptina endógena, aumenta a secreção de TSH (66). Seres humanos geneticamente deficientes em leptina podem ter hipotireodismo central (67,68). A administração de leptina a mulheres com lipodistrofia causou diminuição da secreção de TSH (69). Reforçando uma relação entre leptina e TSH, há a sincronicidade entre os padrões de secreção circadiana de leptina e de TSH (70). Assim, o papel fisiológico da leptina em humanos sobre a secreção de TSH ainda está por ser definido. A galanina tem sido estudada pelo seu efeito estimulatório do apetite, apesar de não ter efeito sobre a secreção basal de TSH, em estudos in vitro, estimula a liberação de TSH estimulada por TRH (71). Talvez este efeito não seja importante, pois, in vivo, injetado sistemicamente, não afeta a secreção de TSH em ratos (72). Porém, a administração do anticorpo para galanina no 3° ventrículo cerebral reduz a secreção de TSH (72). Assim, a galanina endógena pode exercer um efeito estimulador tônico da secreção de TSH, o qual é máximo e, portanto, não sofre alteração pela administração de galanina exógena. O neuropeptídeo Y (NPY), que estimula a ingestão alimentar, parece inibir de forma significativa a secreção de TSH in vivo (73). Este efeito é predominantemente devido à atuação sobre o TRH, uma vez que numerosas fibras de NPY, principalmente originadas no núcleo arqueado, se projetam para os neurônios de TRH no PVN e poucas se projetam para a eminência média. As aferências de neurônios de NPY têm origem, principalmente, no núcleo arqueado, importante núcleo integrador de respostas de controle de ingestão alimentar e, assim, o NPY seria um dos fatores importantes para integrar a função tireóidea ao controle da ingestão alimentar. Assim, o efeito estimulatório da leptina sobre a secreção de TRH pode, em parte, ser indireto por sua ação inibitória do NPY. Outros reguladores da ingestão alimentar também afetam a secreção de TSH, mas não foram devidamente estudados em todos os seus aspectos. O transcrito regulado por anfetamina e cocaína (CART, cocaine-amphetamine regulated transcript) diminui a secreção de TSH em células hipofisárias em cultura (74). Em ratos, a orexina-B, mas não a orexina-A, é capaz de estimular a liberação de TSH quanto injetada no terceiro ventrículo cerebral (75). Assim, não há uma regra lógica quanto ao efeito sobre o TSH em relação à regulação da ingestão alimentar, visto que agentes orexígenos podem inibir ou estimular a secreção de TSH, o mesmo se observando para os anorexígenos. Hormônios Sexuais Os efeitos dos hormônios esteróides sexuais sobre a secreção de TSH são controversos, dependendo da dose empregada, da espécie estudada e do modelo experimental utilizado. Já foram descritos efeitos tanto inibitórios quanto estimulatórios sobre a liberação de TSH, assim como sobre sua síntese (10). Em mulheres na menopausa, o estrogênio aumentou consideravelmente a secreção de TSH (76). Corroborando estes achados, doses fisiológicas de estrogênio administradas a ratas ovariectomizadas aumentam o conteúdo hipofisário de TSH e sua resposta ao TRH (77). Entretanto, doses farmacológicas de estradiol causam diminuição do conteúdo intra-hipofisário de TSH e redução da resposta ao TRH (77), enquanto que a testosterona estimula vários parâmetros da secreção de TSH em ratos castrados (78). A progesterona não teve qualquer efeito sobre a secreção de TSH de ratas castradas (79). O provável mecanismo pelo qual o estrogênio facilita a ação do TRH envolve a diminuição da atividade da ectoenzima, que degrada o TRH na adeno-hipófise (9), assim como o aumento do número de receptores para o TRH. A concentração sérica de estrogênio pode modular a resposta de outros reguladores da secreção de TSH, visto que a hiperestrogenização em ratas ovariectomizadas inibe a ação da NB sobre a secreção de hipófises isoladas (80). Infecções e Estresse Indivíduos em situações de estresse agudo, assim como em certas doenças, podem apresentar diminuição do TSH sérico, apesar de concomitante redução das concentrações séricas de T3 livre. Entretanto, hipotireoidismo verdadeiro é infreqüente, uma vez que geralmente o T4 livre está normal. Estas alterações são geralmente transitórias e desaparecem quando os indivíduos se recuperam, caracterizando a síndrome do T3 baixo. Estudos experimentais demonstraram a presença de vias alfa-adrenérgicas, que manteriam um efeito estimulatório tônico sobre a secreção de TSH. O aumento do TSH sérico em resposta à exposição aguda ao frio ou à hipovolemia seria mediado por ativação a2-adrenérgica de neurônios de TRH no PVN. Entretanto, sabe-se que vias a1-adrenérgicas com origem no locus coeruleus são inibitórias e podem ser ativadas em situações de estresse (7). Os dados em seres humanos são mais limitados. O emprego crônico de drogas bloqueadoras alfa-adrenérgicas, como fentolamina ou timoxamina, reduz a resposta do TRH ao TSH e o pico noturno de TSH. Já o propanolol e outras drogas beta-bloqueadora não alteram de modo significativo a secreção de TSH (7). A administração crônica de agonistas adrenérgicos não produz alteração permanente na secreção de TSH (7). O cortisol é o principal hormônio relacionado ao estresse e inibe agudamente a secreção de TSH, sua pulsatilidade e ritmo circadiano, porém, quando administrado cronicamente, este efeito não perdura (2). Da mesma forma, pacientes com doença de Cushing têm uma produção subnormal de TSH, mas que não apresenta conseqüências sobre a produção de T4 (81). Por outro lado, na insuficiência adrenal sem doença autoimune tireóidea, as concentrações séricas de TSH e sua resposta ao TRH encontram-se elevadas (82). Os efeitos dos opiáceos endógenos são contraditórios. In vivo, a met-encefalina diminui a secreção basal de TSH quanto injetada no 3° ventrículo cerebral (83). Os resultados com ß-endorfina são absolutamente conflitantes, sendo relatados tanto aumento (83) quanto diminuição (84). No entanto, a imunoneutralização da ß-endorfina endógena e da met-encefalina está associada ao aumento do TRH e à liberação de TSH em ratos, sugerindo um papel tônico inibitório destes opiáceos (85). Porém, em indivíduos com doença de Addison, normo ou hipocortisólicos, a naloxana, que é um antagonista opiáceo, inibe a secreção de TSH (82). As citocinas, como interleucina 1-ß (IL-1ß) e 6 (IL-6) e o fator de necrose tumoral (TNF) têm efeitos inibitórios na secreção de TSH quando administrados em animais (86). Este efeito tem sido atribuído tanto a ações diretas na hipófise como indiretas no hipotálamo. As IL-1ß e IL-6 são produzidas na hipófise, onde foram identificadas às proteínas e a seu RNAm, assim como os seus receptores e respectivos RNAm (87,88). Estas substâncias, potentes mediadores inflamatórios, têm sua produção aumentada em doenças sistêmicas agudas e estão associadas a ativação do eixo adrenal nestas situações. É possivel que estas citocinas participem das alterações do eixo tireoideano observadas em doenças agudas, não tireoideanas, inclusive através do estímulo da atividade desiodase hipofisária (89). Porém, não é muito claro o efeito das interleucinas em seres humanos. Frio A exposição aguda ao frio, em ratos, ativa rapidamente o eixo hipotálamo-hipófise-tireóide com aumento da liberação de TRH (7), porém não houve aumento significativo na concentração sérica de TSH quando a exposição ao frio é feita por períodos prolongados (90). Em seres humanos, estes efeitos não são observados em todas as situações. A exposição de neonatos humanos ao frio causa um aumento na liberação de TRH, enquanto em adultos isto não é observado (7). Variações de TSH Durante a Vida A idade é um fator que pode estar associado a modificações da secreção de TSH. Indivíduos idosos podem ter o seu TSH ligeiramente diminuído, apesar de terem níveis de HT normais, por um aumento na desiodação hipofisária de T4, ou na captação de HTs pelo tireotrófo (7). Em ratos, apesar da diminuição das concentrações séricas de HTs, o TSH, geralmente, está normal, o que sugere uma desregulação na retroalimentação por HTs (91,92). Estas alterações parecem ser mais acentuadas no macho que na fêmea, havendo menor secreção basal e, estimulada por TRH, assim como no conteúdo de TSH, em explantes de hipófises de ratos machos velhos (78,91). As fêmeas velhas, pelo contrário, apresentaram maior secreção basal de TSH e nenhuma outra alteração para os outros parâmetros analisados (78). Este dimorfismo sexual quanto à preservação da secreção de TSH nas fêmeas, ao contrário do que ocorre no macho, foi relatado, também, para outras espécies, como macacos e cachorros (93,94). É interessante que o número de receptores para TRH está aumentado, sem alteração na sua afinidade, em animais velhos, sugerindo um bloqueio pós-receptor (95) e que, portanto, haveria uma regulação do número de receptores por algum componente das vias de sinalização celular do TRH. O efeito inibitório do T3 sobre a secreção de TSH também está diminuído em ratos velhos (96). Apesar disso, tanto sua concentração hipofisária quanto a de seus receptores encontram-se elevadas em ratos machos velhos, mas não nas fêmeas (95). Ambas as atividades das desiodases do tipo 1 e do tipo 2 na hipófise encontram-se elevadas em ratos machos velhos (97), enquanto encontram-se diminuídas nas fêmeas (98). Assim, tanto a estimulação quanto a inibição da secreção de TSH podem estar comprometidos no envelhecimento. Portanto, a ação de substâncias que regulam a secreção de TSH podem ser perdidas ou estarem diminuídas, como já comentado para o TRH e T3. Corroborando esta hipótese, observamos ausência de efeito do GRP sobre a secreção de TSH em explantes hipofisários de ratos machos velhos, mas não nas fêmeas (91). Programação da Função Tireóidea Os mamíferos desenvolveram mecanismos extremamente complexos de utilização de energia, que permitem a sobrevivência em situações de carência de nutrientes. Estes mecanismos podem perdurar por toda a vida, facilitando a adaptação a um ambiente de escassez. Entretanto, quando a situação nutricional muda, o que antes poderia significar uma adaptação vantajosa pode vir a se tornar inadequada. Este tipo de programação definida por Alan Lucas (99) estender-se-ia a outros fatores, não necessariamente nutricionais ou metabólicos, que, atuando numa etapa precoce da vida, produziriam mudanças permanentes na fisiologia do animal. Está amplamente aceito que um maior risco para várias doenças crônicas pode ter sua origem antes do nascimento ou no período neonatal, tais como o diabete melito tipo II, hipertensão e doença coronariana (100), associadas ao baixo peso ao nascimento. Coincidentemente, estas doenças caracterizam a chamada síndrome plurimetabólica ou síndrome X, cuja prevalência vem aumentando nos países industrializados e em desenvolvimento, em que se tem evidenciado a transição de desnutrição para obesidade (101). Sabe-se que mudanças nas concentrações séricas de hormônios tireóideos em ratos no período neonatal alteram permanentemente a sensibilidade do eixo hipotálamo-hipófise a estes hormônios (102-104). Os animais tornados hipertireóideos no período neonatal apresentam baixas concentrações séricas de hormônios tireóideos na idade adulta, com diminuição na concentração de TSH e na sua resposta ao TRH. Esta diminuição na secreção de TSH pode ser explicada por uma programação da atividade da 5'-desiodase hipofisária, que encontrou-se aumentada neste modelo experimental (105). Recentemente, mostramos que ratos, cujas mães sofreram desnutrição protéica na lactação, na idade adulta apresentaram uma programação caracterizada por hiperfunção tireóidea e diminuição da secreção de TSH (106). Estes animais apresentaram ao final do período de lactação um aumento na concentração sérica de leptina (107). Assim, resolvemos administrar leptina durante o período de lactação e constatamos que esta programava a função tireóidea destes animais de forma similar ao que ocorria durante a desnutrição (108). Portanto, a regulação da secreção de TSH pode ser programada em períodos críticos e precoces da vida do animal, tanto por fatores nutricionais quanto hormonais. Recebido em 22/10/03 Aceito em 30/10/03
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